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無菌實驗室常用的消毒滅菌方法是什么?

更新時間:2021-11-09 10:01:31 瀏覽量:91
常用的實驗室設(shè)備一般包括玻璃設(shè)備、金屬設(shè)備、橡膠制品和塑料制品等。每種設(shè)備的處理和消毒措施都不同。嚴(yán)格的消毒滅菌工作很重要,直接影響整個實驗?zāi)芊耥樌M(jìn)行。那么無菌實驗室常用的消毒滅菌方法是什么?

目前無菌實驗室常用的消毒滅菌方法主要有物理方法(如干熱滅菌、濕熱滅菌、過濾滅菌、輻射滅菌等。)和化學(xué)方法(消毒劑、抗生素)。

  1.濕熱滅菌

  濕熱滅菌是指用飽和蒸汽、沸水或循環(huán)蒸汽進(jìn)行滅菌,壓力蒸汽濕熱滅菌是目前常用的滅菌方法。它利用蒸汽環(huán)境中的高壓蒸汽、潛熱和良好的穿透力,使細(xì)菌蛋白凝固變性,殺滅微生物。適用于布料工作服、各種器皿、金屬器具、橡膠塞、蒸餾水、棉簽、紙張和一些培養(yǎng)液的滅菌。

  有三種類型

  (1)循環(huán)蒸汽滅菌:指在常壓下,100加熱循環(huán)蒸汽殺滅微生物的方法,滅菌時間通常為30-60分鐘。這種方法適用于不耐熱的制劑的消毒滅菌,但不能保證殺死全部孢子,是一種不可靠的滅菌方法。

  (2)間歇蒸汽滅菌:通過反復(fù)循環(huán)蒸汽加熱,殺死包括孢子在內(nèi)的所有微生物。方法與循環(huán)蒸汽滅菌相同,但需重復(fù)3次以上。每隔一段時間,將待滅菌的物體放入37的培養(yǎng)箱中過夜,以使孢子發(fā)育成繁殖體。如果被滅菌物體不耐100高溫,可將溫度降至75 ~ 80,加熱時間可延長至30 ~ 60分鐘,次數(shù)可增加。適用于不耐熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。

  (3)高壓蒸汽滅菌:103.4 kPa的蒸汽壓力達(dá)到121.3,保溫15-20分鐘。

  2.干熱滅菌法

  是在恒溫干燥箱中利用120C  ~ 150C的高熱90 ~ 120分鐘殺滅細(xì)菌和孢子的方法。主要適用于在壓力蒸汽滅菌器中滅菌不方便、不易被高溫?fù)p壞的玻璃器皿、金屬器具和不能與蒸汽接觸的物品的滅菌。用這種方法消毒的物品干燥,易于保存。酒精燈火焰燃燒殺菌也是干熱殺菌方法之一。動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時,往往需要使用臺面上的酒精燈火焰來補充金屬器皿和玻璃器皿的滅菌。

  3.輻射滅菌法

無菌實驗室采用紫外線燈輻照滅菌法。紫外線是一種低能量的電磁輻射,可以殺死多種微生物。紫外線的作用機(jī)制是使微生物的核酸和蛋白質(zhì)失活。適用于實驗室空氣、地面和手術(shù)臺的消毒。殺菌時間為30分鐘。用紫外線消毒時,應(yīng)注意不要邊照射邊進(jìn)行實驗操作,因為紫外線不僅對人體皮膚有害,而且對培養(yǎng)物和一些試劑也有不良影響。

4.化學(xué)消毒劑消毒方法

  可用于物品、空氣、工作面、操作者皮膚、一些實驗用具等。其不能通過物理方法滅菌。常用的化學(xué)消毒劑有甲醛、70% ~ 75%乙醇、來蘇水、0.1%新潔爾滅、碘伏或碘酊等。其中70% ~ 75%乙醇、10%次氯酸鈉對實驗材料進(jìn)行滅菌。無菌實驗室和培養(yǎng)室采用甲醛或乙二醇(6mL/m3)加熱熏蒸消毒。使用中要注意安全,尤其是皮膚或?qū)嶒灢牧仙鲜褂玫南緞?,只有選擇合適的消毒劑種類、濃度和處理時間,才能達(dá)到安全和滅菌的目的。

  5.過濾滅菌法

  它是一種通過微孔濾膜過濾液體或氣體,使大于濾膜孔徑的細(xì)菌等微生物顆粒被堵塞的殺菌方法。無菌實驗室過濾滅菌法主要用于試劑、酶溶液、血清、培養(yǎng)液等。它們在受熱時容易分解和變性。目前正壓過濾滅菌一般采用微孔膜金屬過濾器或塑料過濾器,或者負(fù)壓過濾滅菌采用玻璃細(xì)菌過濾器和過濾球。濾膜的孔徑應(yīng)在0.22 ~ 0.45微米的范圍內(nèi),或應(yīng)使用較小的細(xì)菌濾膜。溶液通過濾膜后,細(xì)菌和孢子因大于濾膜孔徑而被阻擋,應(yīng)利用濾膜的吸附作用阻擋小于濾膜孔徑的細(xì)菌滲透。

  6.抗生素抑菌法

  主要用于培養(yǎng)基中,是培養(yǎng)過程中防止微生物污染的重要手段,也是微生物污染不嚴(yán)重時的“急救”措施。常用的抗生素有青霉素、鏈霉素、新霉素。
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